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決明子-大黃素和大黃酚的含量測定方法-HPLC1

  
方法名稱:
  決明子-大黃素和大黃酚的含量測定-HPLC1
應用范圍:
  用于決明子中大黃素和大黃酚的含量測定
方法原理:
 本品粉末分別加甲醇、氯仿回流提取,經液相色譜分離,在254 nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設備及實驗條件:
 

儀器設  HP1100 高效液相色譜儀(Anglient C0mpany),包括G1322A 真空脫氣機,G1311A 雙泵,G1314A 紫外檢測器,HP化學工作站

色譜條件 

色譜柱:Hypersil ODS4.6 mm×250 mm,5 μm)

流動相:甲醇-0.1 %磷酸溶液(85∶15)

流速:1.0 mL/min

檢測波長:254 nm

進樣量:20 μL
試樣制備:
 

對照品溶液制備    精密稱取大黃素、大黃酚對照品各5 mg,分別置50 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,分別精密吸取大黃素、大黃酚溶液適量,加甲醇配成每1 mL含大黃素8 μg和大黃酚10 μg的溶液,即得。

供試品溶液制備    取本品粉末(過4號篩)約0.5 g,精密稱定,置50 mL錐形瓶中,精密加入甲醇25 mL,稱定重量,加熱回流30 min,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5 mL,置50 mL圓底燒瓶中,揮去甲醇,加2.5 mol/L硫酸液10 mL,超聲處理5 min,再加氯仿10 mL,加熱回流1 h,冷卻。移置分液漏斗中,用少量氯仿洗滌容器,并入分液漏斗中,分取氯仿層。酸液用氯仿提取2 次,每次約8 mL,合并氯仿液,以無水硫酸鈉脫水,氯仿液移至100 mL錐形瓶中,揮去氯仿。殘渣精密加甲醇10 mL,稱定重量,置水浴中微熱溶解,放冷后,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
操作步驟:
  分別精密吸取大黃素和大黃酚對照液以及決明子供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算大黃素和大黃酚含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:jfsoft.net.cn)
備注:
 
參考文獻:
  王京霞,許家鸞. 決明子中大黃素和大黃酚含量的測定. 中國中醫(yī)藥信息雜志. 2005,12(6):49~50
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