方法名稱： |
雞腸-氨基酸的含量測定-HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本法可用于雞腸中氨基酸的含量測定 |
方法原理： |
雞腸洗凈絞碎冷凍研細(xì)用丙酮: 氯仿(3∶1 V:V ) 的溶液洗滌，再加入112ml內(nèi)含1%苯酚的6mol/L HCl 溶液水解, 經(jīng)液相色譜分離，在254nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器設(shè)備 Waters 高效液相色譜儀(包括810數(shù)據(jù)庫, 510泵, 441紫外吸收檢測器) , P ICO·TA G工作臺, P ICO·TA G氨基酸分析專用柱(15cm ×319mm , C18, 孔徑3Lm) , 微波爐(RE-630D 型 |
試樣制備： |
供試品溶液的制備 將雞腸用水充分洗凈, 經(jīng)絞肉機絞碎, 混勻, 放入冰箱中冷凍。取出用研缽研細(xì), 然后用丙酮:氯仿(3∶1 V:V ) 的溶液多次提取, 過濾，揮干溶劑，稱7m g 樣品于聚四氟乙烯罐內(nèi)，加入112ml內(nèi)含1%苯酚的6mol/L HCl溶液，施緊內(nèi)外蓋，放入微波爐內(nèi)進行微波水解7m in，水解完畢后用水轉(zhuǎn)移定容至5ml。取25μL此溶液在PICO-TAG工作臺上進行抽真空干燥和衍生, 最后用稀釋液稀釋, 取10ul 進樣分析。 |
操作步驟： |
按上述色譜條件，分別取對照品及供試品溶液10μL 進樣，用鉤藤堿和黃芩苷峰面積計算各指標(biāo)成分的含量。 |
附件： |
|
備注： |
|
參考文獻： |
尚素芬,王洪. 雞腸中氨基酸含量的高效液相色譜分析. 氨基酸和生物資源.1997.19.(1);22~24 |
