人工牛黃—膽酸的測定—紫外可見分光光度法

本方法采用分光光度法測定人工牛黃中膽酸的含量。

本方法適用于由牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、牛黃酸、膽紅素、膽固醇、微量元素等制成的人工牛黃。

1. 60%冰醋酸溶液

2. 糠醛溶液（1→100)

3. 硫酸溶液（取硫酸50mL與水65mL混合)

可見分光光度計

對照品溶液的制備

取膽酸對照品12.5mg，精密稱定，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸溶液使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，制成每1mL含膽酸0.5mg的溶液。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密量取對照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL與1mL，分別置具塞試管中，各試管加入60%冰醋酸溶液稀釋成1.0 mL，再分別加新制的糠醛溶液（1→100)1.0 mL，搖勻，在冰浴中放置5分鐘，精密加入硫酸溶液（取硫酸50mL與水65mL混合)13 mL，混勻，在70℃ 水浴中加熱10分鐘，迅速移至冰浴中，放置2分鐘，以相應(yīng)的試劑為空白，照分光光度法，在605nm波長處測定吸光度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 供試品的測定

取本品0.1g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加60%冰醋酸溶液適量，超聲處理5分鐘，用60%冰醋酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液各1mL，分別置甲、乙兩個具塞試管中，于甲管中加新制的糠醛溶液1mL，乙管中加水1mL作空白，分別搖勻，在冰浴中放置5分鐘，精密加入硫酸溶液（取硫酸50mL與水65mL混合)13 mL，混勻，在70℃ 水浴中加熱10分鐘，迅速移至冰浴中，放置2分鐘，以相應(yīng)的試劑為空白，照分光光度法，在605nm波長處測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含膽酸的重量，計算。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.4。