腺苷鈷胺—腺苷鈷胺的測(cè)定—分光光度法

本方法采用分光光度法測(cè)定腺苷鈷胺（C₇₂H₁₀₀CoN₁₈O₁₇P)的含量。

本方法適用于腺苷鈷胺的測(cè)定。

取本品適量，加水制成每1mL中約含0.5mg的溶液。量取此溶液兩份，分別用氯化鉀溶液和磷酸緩沖溶液（pH7.0)為稀釋劑稀釋至刻度，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，以各自的稀釋劑為空白，采用以氯化鉀溶液制得的稀釋液，在304.5nm波長(zhǎng)附近（每間隔0.2nm)找出最大吸收波長(zhǎng)，分別測(cè)定吸收度，計(jì)算吸收度差值，按C₇₂H₁₀₀CoN₁₈O₁₇P的吸收系數(shù)（△E1m)為58.0計(jì)算，即得。

1. 蒸餾水

2. 氯化鉀溶液

3. 磷酸緩沖溶液（pH7.0)

1. 氯化鉀溶液

取0.2mol/L氯化鉀溶液250mL與0.2mol/L鹽酸溶液53mL，加水稀釋至1000mL。

2. 磷酸緩沖溶液（pH7.0)

取磷酸二氫鉀0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1mL，用水稀釋至100mL，即得。

3. 供試品溶液的制備

取本品，精密稱(chēng)定，加水制成每1mL中約含0.5mg的溶液。精密量取此溶液各5mL，置兩個(gè)50mL量瓶中，分別用氯化鉀溶液和磷酸緩沖溶液（pH7.0)為稀釋劑稀釋至刻度，作為稀釋液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

注：“水分測(cè)定”用烘干法。取供試品2-5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱(chēng)量瓶中，厚度不超過(guò)5mm，疏松樣品不超過(guò)10mm，精密稱(chēng)定，打開(kāi)瓶蓋在100-105℃干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱(chēng)定重量，再在上述溫度干燥1小時(shí)，冷卻，稱(chēng)重，至連續(xù)兩次稱(chēng)重的差異不超過(guò)5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含有水分的百分?jǐn)?shù)。

供試品的測(cè)定

照紫外-可見(jiàn)分光光度法，以各自的稀釋劑為空白，采用以氯化鉀溶液制得的稀釋液，在304.5nm波長(zhǎng)附近（每間隔0.2nm)找出最大吸收波長(zhǎng)，分別測(cè)定吸收度，計(jì)算吸收度差值，按C₇₂H₁₀₀CoN₁₈O₁₇P的吸收系數(shù)（E1m)為58.0計(jì)算，即得。