氯霉素—氯霉素的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定氯霉素 (C₁₁H₁₂ Cl₂N₂O₅)的含量。

本方法適用于氯霉素的含量測定。

取本品適量，加甲醇溶解后，用流動相定量稀釋制成每1mL中約含氯霉素0.10mg的溶液，量取適量注入液相色譜儀，在272nm波長處檢測，記錄色譜圖。另取氯霉素對照品適量，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。

1. 甲醇

2. 0.1%庚烷磺酸鈉溶液

取0.1%庚烷磺酸鈉溶液500mL，二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混勻。

3. 二甲基甲酰胺

4. 冰醋酸

5. 乙腈

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按氯霉素峰計算不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：0.1%庚烷磺酸鈉溶液＋乙腈=75 25

2.2 檢測波長：272nm

2.3 柱溫：室溫

取0.1%庚烷磺酸鈉溶液500mL，二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混勻。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取氯霉素對照品適量，加甲醇5mL溶解后，用流動相定量稀釋制成每1mL中約含氯霉素0.10mg的溶液，搖勻，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品約50mg，精密稱定，加甲醇5mL溶解后，用流動相定量稀釋成每1mL中約含0.10mg的溶液，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密量取供試品及對照品溶液10μL注入液相色譜儀，在272nm波長處檢測，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.776。