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1.4 實(shí)驗(yàn)方法
1.4.1 動(dòng)物建模 40只大鼠預(yù)養(yǎng)一周后，隨機(jī)選取一組10只為正常對(duì)照組，剩余30只空腹12 h，腹腔注射1% STZ-檸檬酸鈉緩沖液35 mg/kg體質(zhì)量。對(duì)照組注射等量檸檬酸鈉緩沖液，依據(jù)72 h后尿糖+++～++++，尾靜脈采血測血糖，血糖≥16. 7 mmol/L者，確定模型建立。除去造模失敗及實(shí)驗(yàn)過程中死亡大鼠，將糖尿病鼠22只納入本實(shí)驗(yàn)。
1.4.2 分組 （1)正常對(duì)照組（CN組10只)：糖尿病鼠隨機(jī)分為；（2)糖尿病組（D組11只)：（3)葛根素治療組（S組11只)，S組每只給予160 mg/kg/d葛根素注射液進(jìn)行腹腔注射，CN組腹腔注射等容量0.9%氯化鈉溶液，均連續(xù)干預(yù)14周。
1.4.3 標(biāo)本采集 第14周實(shí)驗(yàn)終止時(shí)，各組大鼠在禁食的基礎(chǔ)上，用代謝籠收集24 h尿液，測定尿白蛋白含量，動(dòng)物經(jīng)乙醚麻醉后心臟取血。測試生化指標(biāo)：（1)空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG)采用便攜式血糖儀測定；（2)尿微量白蛋白（urinary microalbumin，U-mAIb)采用ELISA法測定；（3)內(nèi)皮素（endothelin，ET)采用放免法測定；（4)降鈣素基因相關(guān)肽 （CGRP)用放免法測定。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
所有數(shù)據(jù)用SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s)表示，各組均數(shù)之間均用單因素方差檢驗(yàn)（one-way ANOVA)進(jìn)行差異性比較，其中P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P < 0.01為差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1糖尿病大鼠模型的建立
注射STZ后72 h，糖尿病組空腹血糖明顯升高（P < 0.01)，空腹血糖均值達(dá)到19.51 mmol/L；葡萄糖耐量試驗(yàn)：兩組大鼠禁食12 h后，按2 g/kg·BW葡萄糖進(jìn)行灌胃，尾部微量取血，分別測0.5、1.0、2.0 h血糖。實(shí)驗(yàn)組大鼠1 h血糖值達(dá)到高峰，2 h仍高；對(duì)照組0.5 h達(dá)到高峰，2 h恢復(fù)空腹水平，提示實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)糖耐量異常，且實(shí)驗(yàn)組大鼠空腹血糖≥16. 7mmol，表明糖尿病大鼠造模成功。見表1。
2.2 葛根素干預(yù)對(duì)DN大鼠相關(guān)生化指標(biāo)的影響
各組測得FBG、U-mAIb和ET值，D組和S組都較CN組顯著升高（P < 0.05)，經(jīng)過14周葛根素干預(yù)后，S組較D組顯著下降（P < 0.05)；而血漿CGRP值，D組和S組較CN組顯著下降（P < 0.05)，且S組較D組明顯升高（P < 0.05)。見表2。
