藥理學實驗的基本知識和技術(shù)
一、實驗動物的捉拿、固定及給藥方法
1.小白鼠：右手抓住鼠尾，放在臺上或鼠籠蓋鐵絲網(wǎng)下，然后用左手拇指沿其背部向前抓住其頸部皮膚，并以左手的小指和掌部夾住其尾固定在手上。另一抓法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾尖，后用手掌及小指夾住其尾巴，再以拇指及食指捉住其頸部皮膚。前一方法易學，另一方法稍難，但便于快速捉拿給藥。
小鼠灌胃（ig)法：將小鼠固定后，右手持裝有灌胃器的注射器，自口角外插入口腔，沿上顎插入食道。如遇阻力，可將注射器拔出再插，以免穿破食道或誤入氣管，造成動物死亡。灌胃容量一般為0.1—0.2ml/10g，不超過0.5ml/只。
小鼠皮下注射(sc)法：兩人合作，一人一手抓住小白鼠頭部皮膚，另一手抓住鼠尾。另一人注射藥物。注射部位在背部皮下組織。如一人操作時，左手抓鼠尾，讓鼠爬在鐵絲籠上，右手將抽好藥液的注射器針頭插入背部皮下組織。如一人操作時，左手抓鼠尾，讓鼠爬在鐵絲籠上，右手將抽好的藥液的注射器針頭插入背部皮下將藥注入。注射量不超過0.5ml/只。
小鼠腹腔注射(ip)法：左手持鼠，右手持注射器從下腹左或右側(cè)（避開膀胱)朝頭部方向刺入，宜先刺入皮下，經(jīng)2—3mm再刺入腹腔，此時針頭與腹壁的角度約45度。針尖插入不宜太深或太近上腹部，避免刺破內(nèi)臟，注射量一般為0.1—0.25ml/只。
小鼠尾靜脈注射法(iv)：將小鼠置于固定器內(nèi)，使其尾巴露出，用70%酒精擦尾部，或?qū)⑹笪步?0℃熱水中。待尾部靜脈擴張后，左手拉尾，右手進針。注射容量不超過0.5ml/只。
2.兔：用手抓起它脊背近后頸處皮膚，抓的面積越大其持重點越分散。如家兔肥大，應(yīng)再以另一手托住它的臀部，將持重點承托于手上。
將兔作仰臥位，一手仍抓住頸部皮膚，另一手順其腹部撫摸至膝關(guān)節(jié)，壓住關(guān)節(jié)。另一人用繩帶捆綁四肢，使兔腹部向上，固定在兔手術(shù)臺上。頭部則用兔頭固定夾固定。
兔灌胃法：二人合作，一人固定家兔于兩膝之間，一手固定兔頭，使頭部后仰，另一手將開口器插入兔口，并向后翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使兔舌伸直并壓在開口器下面。另一人將胃管從開口器中央孔也插入口內(nèi)緩慢插入食道和胃。插管時感覺順利，動物不掙扎，也不屏氣，表示胃管在胃內(nèi)，為慎重起見，將胃管外端放入水中，當兔呼氣時，未見氣泡出現(xiàn)，即證實胃管在胃內(nèi)，然后將藥液緩緩經(jīng)胃管注入。灌胃容量一般為10ml/kg。
兔耳靜脈注射法：兩人合作，一人固定兔身及兔頭，一人將兔耳后緣之毛拔去，顯露耳緣靜脈，用手指輕彈耳殼，使血管擴張。助手左手指壓住耳緣靜脈根部，待血管明顯充血后，將抽好藥液的注射器從靜脈近耳尖處插入血管。針頭刺入血管以后，以左手拇指和食指將針頭與兔耳固定，不讓針頭滑動。放開耳根靜脈手指壓力，即可注入藥液，若針頭確實在血管內(nèi)，則推藥通暢無阻力，并見血液被藥液沖走，如沆入皮下則耳殼腫脹、推注不順，需拔出重新注射。注射守畢，用手指按在針眼上，然后將針尖抽出，并繼續(xù)用手指或加棉球輕輕按壓2—3分鐘，以防出血，注射量0.5—2.5ml/kg。
3.大白鼠：以左手或持夾子抓住鼠尾，左手戴防護手套或用厚布蓋住鼠身作防護，握住其整個身體，并固定其頭骨，防止被咬傷，注意不要握力過大，勿捏其頸部以免窒息致死，根據(jù)實驗需要可指定于大鼠固定籠內(nèi)或用繩綁其四肢，固定于大鼠手術(shù)臺上。
大白鼠灌胃、腹腔注射、靜脈注射均可一人操作，基本方法與小鼠相似。也可將大鼠腹股溝切開，從股靜脈注射藥物，也可從外頸靜脈插管給藥（麻醉后)。
二、藥理實驗設(shè)計的基本原則
重復：重復的醫(yī)學招聘網(wǎng)目的是看實驗結(jié)果的重現(xiàn)率，重現(xiàn)率越高，實驗的可信性就越好。重現(xiàn)率在95%以上者，可認為實驗相當可靠，兩藥平均值或效率的差別有顯著意義，并用“P（機率)<0.05”來表示，意即指：“不能重現(xiàn)的可能性小于5%”，如重現(xiàn)率在99%以上者可信為實驗非�？煽浚勺龀觥安顒e有非常顯著意義”的結(jié)論并用“P<0.01”來表示；重現(xiàn)率小于95%者，說明重復同樣實驗100次，將有5次以上機會出現(xiàn)相反的結(jié)果，固此認為兩藥的差別可能是個體差異而造成的，統(tǒng)計學上可做出“兩組差別并無統(tǒng)計學意義”的結(jié)論，并以P>0.05來表示。但這種結(jié)論并不意味著兩組無差別。一般可在檢查原因后，改進實驗條件，增加實驗例數(shù)，還有可能提高實驗的重現(xiàn)率，達到統(tǒng)計學上有顯著意義的水平。實驗結(jié)果的實際價值，不但需從統(tǒng)計結(jié)論來看，還應(yīng)從專業(yè)角度來看。在統(tǒng)計學上都是達到P<0.05的水平，實驗例數(shù)多者并不一定比例數(shù)少者更有價值。但為了作出正確的結(jié)論，根據(jù)實驗設(shè)計中的重復原則，對各類動物的重復數(shù)，可提出一個大體范圍，以供實驗設(shè)計參考。
2.對照：對照是比較的基礎(chǔ)，沒有比較就沒有鑒別，也就談不上科學性。對照應(yīng)符合“齊同可比”原則，除了所研究的因素（藥物)外，其他條件各組也應(yīng)一律“齊同”。如動物的性別、年齡、體重。一般健康狀況等，也應(yīng)基本一致，只有這樣才能具備“可比性”。所以實驗設(shè)計必須設(shè)立對照組。對照組的類型有以下三種：
（1)陰性對照：包括①空白對照，即不給任何處理的正常動物作對照，較少用。②假處理對照，即除不用被研究的藥物外，對照組的動物重經(jīng)受同樣的處理，如麻醉、手術(shù)、注射不含藥物的溶媒等。這種對照的可比性好，較常用。
（2)陽性對照：包括①標準品對照，即以典型藥物劃標準品作為對照，以便評定藥物的作用強度。②弱陽性對照，即以藥效較弱的老藥作為對照。如果新藥優(yōu)于老藥，并有顯著意義，則可肯定新藥的價值。
3．隨機：隨機就是使每一個體在實驗中都有同等的機會，隨機遇而分組或接受處理。隨機可減少許多難以控制的干擾因素，消除偏差。
藥理實驗常用符號
度量衡及劑量符號
L（l)，升 | dl， 分升（10-1L) |
ml，毫升（10-3L) | μl，， 微升（10-6L) |
kg，千克（公斤) | g， dq （10-3kg) |
mg，毫克（10-3g) | μg，， 微克（10-6g) |
ng，納克（10-9g) | pg， 皮克（10-12g) |
mol，摩爾 | mmol， 毫摩爾（10-3mol) |
nmol，納摩爾（10-9 mol) | μmol， 微摩爾（10-6mol) |
cm ，厘米10-2m | m， 米 |
μm ， 微米（10-6m) | mm， 納米（10-3m) |
mmHg， 毫米汞柱 | nm， 納米（10-醫(yī).學全在線9m) |
Pa，帕（1mmHg=133.3Pa) | MmH2O，毫米水柱 |
LD，致死量 | Kpa，千帕 |
MLD，最小致死量 | LD50，半數(shù)致死量 |
MED，最小有效量 | ED50，半數(shù)有數(shù)量 |
IU，iu，國際單位 | U，u，單位 |
M，克分子 | Ppm， 百萬分之一 |
mEq， 毫克當量 | N，當量 |
用 藥 途 徑 符 號
id（ID)皮內(nèi)注射 | SC（iH)，皮下注射 | ip（IP)，腹腔注射 | im（IM)，肌肉注射 |
iv（IV)靜脈注射 | Iv（IVgtt)，靜脈滴注 | po（PO)，口服，經(jīng)口 | ig（IG)灌胃 |
其 他
♂，雄性 | ♀雌性 | X，均數(shù) | SD，標準差 | SE，標準誤 | ±，加或減 |
>，大于 | <，小于 | Bp，血壓 | ECG，心電圖 | OD，光亮度 | |
wt，體重 | vol，容量 | ||||
